920685

01论文摘要
我们先前发现,环化酶抑制剂三丙胺(TPA)可显著增强三孢布拉霉(Blakeslea trispora)中番茄红素的积累。为阐明TPA增强番茄红素积累的机制,采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱(UHPLC-Q-TOF/MS)对TPA处理后的三孢布拉霉进行非靶向代谢组分析。共鉴定出42种差异代谢物,其中筛选出15种满足变量投影重要性(VIP)>1、P<0.05且倍数变化(fold change)>1.5的显著差异代谢物。下调的代谢物主要为环二肽、抑菌化合物和脂质,而上调的代谢物主要为不饱和脂肪酸。此外,TPA处理后三孢布拉霉的抑菌能力较弱,胞外和胞内pH较高,且带有囊泡的菌丝出现局部膨大。我们的数据表明,TPA增强番茄红素积累不仅通过抑制β-胡萝卜素环化,还通过以下方式实现:下调用于群体感应的环二肽;上调不饱和脂肪酸、1-棕榈酰-2-羟基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺和4-羟基苯甲酸,并下调胆碱,导致菌丝局部膨大并伴液泡形成;以及下调抑菌代谢物以实现代谢通量重分配。

02新芝产品支持

The cultures were then crushed and homogenized by liquid nitrogen grinding and tissue grinder, respectively. Then,methanol/acetonitrile (1:1. v/v) was added, and the cells were broken up in two rounds by using a Scientz-IID sonifier (Ningbo Scientz Biotechnology Co., China) for 30 min each round.
随后,分别用液氮研磨和组织研磨机将培养物破碎并均质化。接着,加入甲醇/乙腈(1:1.体积比),使用 SCIENTZ- IID 超声仪(中国宁波 新芝生物科技股份有限公司)分两次破碎细胞,每次 30 分钟。
在三孢布拉霉非靶向代谢组分析中,培养物经液氮研磨和组织研磨机均质后,加入甲醇/乙腈提取,并使用新芝SCIENTZ-IID超声波细胞粉碎机分两轮破碎细胞,每轮30分钟。
三孢布拉霉菌丝细胞壁较坚韧。SCIENTZ-IID通过超声空化作用进一步破坏细胞结构,使胞内代谢物充分释放,为后续UHPLC-Q-TOF/MS检测提供稳定样本基础。
03研究结果
该研究筛选出15种显著差异代谢物,其中10种下调、5种上调。TPA增强番茄红素积累主要通过三条路径:
▼下调环二肽,启动群体感应
His-Pro、His-Ile、His-Phe等环二肽显著下调,胞内外pH升高,推测启动QS促进番茄红素积累。
▼膜脂重塑,菌丝局部膨大
不饱和脂肪酸和PPE上调,胆碱下调,菌丝局部膨大并伴小囊泡/液泡形成,增加番茄红素积累空间。
▼抑菌代谢物下调,通量重分配
苯乳酸、IVG等抑菌代谢物下调,4-HBA上调,代谢通量转向脂质代谢和菌丝生长。
TPA不仅抑制β-胡萝卜素环化,还通过QS启动、膜脂重塑和代谢通量重分配协同增强番茄红素积累。SCIENTZ-IID在样本前处理中承担了关键破壁环节,助力高质量代谢组数据获取。
论文出处:
Wang Y, Wang Y, Wang Y, Chen X, Liu C, Zhang M, Liu K, Zhao Y, Li Z. Untargeted Global Metabolomic Analysis Reveals the Mechanism of Tripropylamine-Enhanced Lycopene Accumulation in Blakeslea trispora. Frontiers in Bioengineering and Biotechnology, 2021. 9: 673225. doi: 10.3389/fbioe.2021.673225.
上一篇: 论文分享|ASGPR 介导肝癌靶向壳聚糖纳米粒,SCIENTZ‑10N 冷冻干燥机助力样品制备
下一篇: 没有了
24小时服务热线 18106650612