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01论文摘要
莽草酸(SA)是多种高附加值芳香族化合物合成过程中的关键中间体,广泛应用于食品与制药工业。本研究通过动态与静态调控策略实现了在大肠杆菌中高效合成SA的目标。通过对SA合成途径中的关键酶(AroGfbr、AroB、AroD及AroE)以及调控细胞生长的基因pykF进行初步优化,使SA的积累量达到7.4 g/L;随后,通过调控gapN与zwF基因的表达以确保充足的NADPH供应;接着对SA感应模块进行优化,使其响应范围扩展至25 g/L SA;并构建并表征了一套负反馈调控系统,以平衡细胞生长与最大SA产量。采用加速进化策略增强了菌株的耐受性,并通过转录组分析鉴定出通过该机制赋予耐受性的调控因子StpA。
最终,将具有耐受性的工程菌株SA35在5 L生物反应器中进行发酵,其SA浓度较对照菌株SA33提高1.3倍,达到97.3 g/L,葡萄糖转化率为0.32 g/g。因此,这些方法为SA及其衍生物的高效合成提供了重要参考。
02新芝产品支持

The strain to be determined was inoculated into a 96-well microplate at a 2% inoculation volume and then placed in a microbial growth curve detector MGC-500 (Ningbo XinZhi Biotechnology Co., Ltd.) for cultivation at 37 °C and 900 rpm. OD600 was measured every 30 min.
待测菌株以2%的接种体积接种于96孔微孔板中,随后置于微生物生长曲线检测仪 MGC-500(宁波新芝生物科技股份有限公司)中,在37°C、900 rpm条件下进行培养。每30分钟测定一次OD600值。
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