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实验背景:在从蝙蝠、小鼠及蛙类组织中获得生物大分子,用于后续的病原体鉴定与功能基因组学分析。实验采用新芝生物冷冻型高通量组织研磨器进行样本前处理,以确保在低温条件下快速、均一地破碎细胞,并有效防止生物分子降解,为精准的下游分析奠定基础。
传统研磨方法存在的痛点:
安全隐患与气溶胶污染:动物组织样本易产生携带病原体的气溶胶,对实验人员构成暴露风险,并可能导致样本间交叉污染,尤其是蝙蝠等可能携带未知病毒的样本。
分子易降解:RNA、DNA及蛋白质在研磨产热或长时间处理下极易发生降解、变性,导致失活。
生物分子易变性:样品为蝙蝠、小鼠及蛙类组织,但长时间研磨产生的高温,容易导致生物分子变性,影响活性。
效率低下:手工研磨或普通设备研磨干猪皮耗时较长,不容易彻底研磨。
实验样品:蝙蝠、小鼠及蛙类组织
实验目的:验证新芝生物冷冻型高通量组织研磨器通过深度冷冻与高频振荡研磨,能否有效应对多种动物组织研磨的难题,在确保生物安全的同时,实现细胞的高效破碎与生物大分子的高质量回收。
实验设备:
高通量组织研磨器SCIENTZ-48L
实验耗材:2ml研磨管、6mm研磨珠2颗,3mm研磨珠3颗、800ul裂解液
实验步骤:
1. 样本前准备:称取30mg组织样本,迅速转移至预冷的2ml研磨管中。根据组织韧性,加入1-2颗适量直径的研磨珠。随后,向管内精确加入800μL相应的裂解液。
2. 参数设置:设置运行参数为:频率70Hz,单次运行时间60秒,间歇暂停5秒,循环5次。同时,启动设备的冷冻系统,确保研磨在4℃ 的低温环境下进行。
3. 进行研磨:将适配器与样本装入研磨器,确保严格配平后锁紧舱门,启动程序。设备将自动执行设定的间歇研磨程序。
4. 结束取样:建议在生物安全柜内开启研磨管,可获得均质、无气泡的组织匀浆液。
实验结果:

左:研磨前;右:研磨后
新芝生物冷冻型高通量组织研磨器处理后,蝙蝠、小鼠及蛙类的各类组织被研磨为细腻的细胞匀浆液,无可见组织块残留。应用证明,获得的核酸完整性好、蛋白质活性高,满足测序、病原PCR检测及等分析的要求。
注意事项:
1. 处理野生动物组织(尤其是蝙蝠)必须在相应等级的生物安全柜中进行,操作人员需佩戴全套个人防护装备。所有耗材均需作为生物危险废物进行处理。
2. 运行前必须确保适配器严格配平,以保证设备稳定运行并避免损坏。
3.样品与研磨珠不宜过满,需保留适当研磨空间。
4.开启研磨罐时,应在安全柜进行操作,防止吸入和交叉污染。
5.设备维护:每次使用后清洁研磨腔,定期检查电机振动平衡性。
实验表明,新芝生物冷冻型高通量组织研磨器为各类动物组织的前处理提供了理想方案。该设备有效解决了生物安全、分子降解和均质化三大难题,显著提升了工作效率与数据的可靠性,对相关科研工作具有重要价值。
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