新芝生物组织研磨仪助力“非洲猪瘟”样品处理

　　八戒：猴哥救我!

　　悟空：呆子，何事慌张!

　　八戒：猴哥你没听说吗!非洲猪瘟来了，一个被传染，一窝都遭殃啊!我听说辽宁、黑龙江、吉林、江西、福建、四川好多兄弟都已经被扑杀了。

　　悟空：呆子!那还不离我远点!

　　问题一、什么是非洲猪瘟？

　　非洲猪瘟（African Swine fever，ASF）是由非洲猪瘟病毒（African Swine fever virus，ASFV）感染家猪和各种野猪（不传染人）引起一种急性、出血性、烈性传染病。其特征是发病过程短，最急性和急性感染死亡率高达100%，且只能依靠实验室监测确诊。

　　2018年8月3日我国确诊首例非洲猪瘟疫情。

　　问题二、目前在中国的传染范围？

　　自8月初我国首次发现非洲猪瘟以来，截至11月22日，全国有20个省份47个市（区、盟）发生73起家猪疫情、1起野猪疫情，累计扑杀生猪60万头。全国非洲猪瘟疫情呈现多点散发状态，但在各地动物疾控部门的积极行动下，疫情开始趋于平稳，总体防控有效。

　　问题三、非洲猪瘟检测的样品处理方法介绍

　　一、非洲猪瘟样品处理

　　1. 目的

　　规范ASFV样品和实验材料的处理程序，保证ASFV相关实验的顺序开展和实验室的生物安全。

　　2. 适用范围

　　适用于疑似ASFV临床样品的实验前的处理

　　3. 程序

　　3.1实验材料

　　ASF的易感动物，主要为家猪、野猪和蜱，通常采集的样品为家猪、野猪的血液样品、组织样品以及蜱三类。田间采集的样品通常需要经过简单的预处理，才能进行后续的检测、诊断工作。

　　血清：用于病毒核酸检测、病毒抗原和抗体检测。将采好的猪血的注射器或采血管在室温下倾斜静止2~4h(防止暴晒)，或置于37℃温箱内1h，待大部分血清析出后，取出血清，必要时经离心分离血清。(最低建议量5ml)。

　　抗凝全血：用于病毒核酸检测和病毒抗原检测。

　　采血前，在真空采血管或注射器内按比例加入抗凝剂。采集血液，轻轻上下颠倒，使血液与抗凝剂充分混匀，防止血液凝固的同时避免溶血。也可以将血液放入装有玻璃珠的灭菌瓶内，震荡脱落纤维蛋白。必要时，可加入双抗以抑制血源性或采血过程中可能出现的细菌污染。

　　当血样用于病毒核酸检测时，一般不用肝素而选用EDTA作为抗凝剂。(最低建议量1mL)。

　　组织样本：活体采集，采用扁桃体，用于临床健康动物ASF监测。

　　尸体剖检ASF发病动物或死亡动物经解剖取材，包括：ASFV靶器官的采集：脾脏、淋巴结、肾脏、扁桃体。

　　其他病变组织脏器的采集：采集具有明显病变的肝脏、肺脏、心脏等组织器官，选取部位在病变和健康组织交界处。

　　腐败动物尸体的样品采集：剖检取股骨，将附着的肌肉和韧带等全部剔除，采集骨髓。最低建议量5克。

　　蜱的采集：蜱可进行核酸检测、抗原检测和蜱的形态学鉴定，查找猪圈的墙边、墙缝、木质或瓦质的屋顶，或挖掘猪圈地面均可能找到蜱，也可查看猪表皮，采集蜱。

　　1-1样品保存条件

　　注：用于病毒分离和病理学检测的样品禁止-20℃保存。

　　3.2实验器材和试剂

　　台式高速冷冻离心机、组织研磨仪、水浴锅、计时器、冰箱和移液器等。

　　无菌的剪子、镊子、钢珠、2mLEP管、移液器吸头(10μL,200μL、1000μL)等。

　　其他试剂和耗材主要包括：0.01mol/L PBS(PH7.2)、0.8%NaOH、75%酒精棉球等。

　　3.3样品处理程序

　　3.3.1血清及全血样品处理

　　取血清或全血样品1mL于灭菌EP管里，保存备用

　　3.3.2组织样品处理

　　适用于脾脏等组织样品和蜱的处理。尽可能减少污染，每取一个组织块或蜱，用火焰消毒剪镊等取样器械，组织块应分别放入灭菌容器内并立即密封，做好标记，注意防止组织间相互污染。

　　3.3.2.1组织样品的处理应在二级生物安全柜中进行，勿使液体溅到生物安全柜中。

　　3.3.2.2将0.1-0.2g组织块放入2mLEP管中，用剪刀剪成碎块，加1-2mL0.01mol/L PBS(PH7.2),再加入1-2粒灭菌钢珠，密封后，表面消毒备用。剩余样品放回容器内，重新密封，表面消毒后保存-70℃冰箱。

　　3.3.2.3组织样品的破碎可以利用组织研磨仪在生物安全柜外操作，将样品制成组织悬液。

　　重磅推荐使用Scientz-48L冷冻型高通量组织研磨器!

　　3.4病毒灭活

　　病毒的灭活处理应在二级生物安全柜中进行，将处理好的血清、全血或者研磨破碎后的组织样品连同EP管放入60℃水浴中，放置30min灭活。

　　3.5使用后仪器处理

　　剪刀、镊子等均应放入消毒缸进行消毒，放入铁饭盒内，并装入密封袋内进行高压灭菌处理。装有组织样品保存液的容器和盛有组织块的离心管应密封管口，表面消毒后放入密封袋中高压灭菌。钢珠、吸头等废弃物应用0.8%NaOH浸泡30分钟消毒后，置密封袋内高压灭菌。消毒残液应装入密封容器内高压灭菌处理。

　　3.6注意事项

　　操作之前要确认生物安全柜和实验室已进行了彻底的卫生消毒处理，防止样品间交叉感染。

　　二、非洲猪瘟病毒的核酸检测可用实时荧光PCR配套相应实际进行，具体操作步骤以仪器生产公司指南为准。

　　问题四、病毒杀灭和防控方式

　　非洲猪瘟病毒虽然在环境中比较稳定，但在猪肉烹煮处理过程中较易失活，70℃-75℃>加热30分钟以上，病毒就会被杀灭，也就是说我们日常烹饪过程中只要把猪肉熟透(包括最中间部位温度至少达到70℃以上)，即使有病毒也会很快失去感染力并丧失活性。

新芝生物Scientz-48L冷冻型高通量组织研磨器介绍

　　新芝生物推出的Scientz-48L冷冻型高通量组织研磨器具备以下特征：

　　1.应用场景多样。可以对不同组织进行干磨、湿磨、混合以及均质化处理。

　　2.实验效率高。能提高提取大通量样品中核酸的效率和质量。

　　3.实验过程安全。研磨过程采用封闭式一次性离心管，有效地避免了样品交叉污染。

　　4.仪器稳定性好。对同一组织样品可设定相同的研磨程序，从而获得相同的研磨效率，提高了实验的可重复性。

　　5.研磨效果好。产品采用高效研磨球进行研磨，相较于传统研磨方式对样品的研磨更为均匀、充分。

　　目前，新芝生物Scientz-48L冷冻型高通量组织研磨器已助力沈阳、大连、朝阳、本溪、鞍山、锦州、葫芦岛等多地动物疾控中心用于非洲猪瘟检测实验的样品前处理。

　　Scientz-48L冷冻型高通量组织研磨器高效、稳定、安全的仪器特性很好地解决了检测过程中检测样品数量多、实验一致性难以控制等问题，得到了广大用户的一致好评。

　　产品用途

　　1.适用于各种植物组织包括根、茎、叶、花、果、种子等样品的研磨破碎;

　　2.适用于各种动物组织包括大脑、心脏、肺、胃、肝脏、胸腺、肾脏、肠、淋巴结、肌肉、骨骼等样品的研磨破碎;

　　3.适用于真菌、细菌等样品的研磨破碎;

　　4.适用于食品、药品成分分析检测的研磨破碎;

　　5.适用于易挥发样品包括煤炭、油页岩、蜡制品等样品的研磨破碎;

　　6.适用于塑料、聚合物包括PE、PS、纺织品、树脂等样品的研磨破碎。

　　主要技术参数

　　1.时间设定：1(秒)-9999(秒)

　　2.频率设定：10-70Hz，即振荡300-2100次/min

　　3.额定功率：180W

　　4.夹具行程：34mm(垂直)

　　5.温度设置 : -20℃或者-30℃

　　6.电磁锁控制开门

　　7.样品容量：随机标配：铝合金适配器5ml 12孔，2ml 48孔

　　可选配：铝合金适配器2ml24孔

　　8.电源需求：220V单相交流，<2.5A

　　新芝生物公司简介

　　宁波新芝生物科技股份有限公司(股票代码：430685)始创于1989年，公司总部位于宁波市国家高新区，注册资金6102万元，是全球知名的生物样品处理设备提供商，也是国内超声波技术应用探索的先行者。

　　依托强大的科研技术实力，公司在超声波、温湿度、高低压、超低温等技术层面积累了丰厚的经验，并先后研究开发包括生物样品前处理仪器、分子生物学仪器、实验室洁净设备、冷冻干燥设备、工业防垢除垢设备、环保除藻防控设备在内的多款产品。公司始终坚持业界前沿的技术研究和应用开发，致力于为科研、教育、环保、医疗、制药、石化、农林、材料等领域客户提供先进的产品设备和行业解决方案。

　　公司目前拥有宁波、杭州两地四大研发中心，拥有高水平研发人员数十人，专利60余项。公司曾多次承担国家科技部、发改委、卫生部重大科研项目，是国家发改委高技术产业化示范工程中心、科学仪器产业化基地、宁波企业工程(技术)中心。公司研制的高压气体基因枪一举打破国外技术垄断，填补国内相关领域空白，荣获浙江省科技进步二等奖。

　　公司高度重视品牌培育和市场开拓，为更好地服务客户，公司在全国各地建有30余个办事处，办事处均配备销售工程师和售后工程师，可随时满足客户需求。全球超过15,000家实验室在使用新芝生物的产品，各类仪器设备市场保有量超过100,000台套，产品远销美、英、法、俄、日、韩等36个国家，公司年度销售收入突破1亿元人民币，已经成为国内乃至全球知名的生物样品制处理设备研制专家。

　　新芝生物30年风雨兼程，以新致心，将继续致力于为各行业客户提供优质的产品和贴心的服务！